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GBT18204.5-2013 公共場所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法第5部分集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng).pdf

1范圍

GB/T 18204的本部分規(guī)定了公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水、空調(diào)送風(fēng)、空調(diào)風(fēng)管以 及空調(diào)凈化消毒裝置各項(xiàng)衛(wèi)生指標(biāo)的測定方法。

本部分適用于公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)的測定。其他場所、居室等使用的集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)可 參照執(zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T 15438環(huán)境空氣臭氧的測定紫外光度法

GB/T 18204.1-2013公共場所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 第1部分：物理因素

GB/T 18204.2-2014公共場所衛(wèi)生檢驗(yàn)方法 第2部分：化學(xué)污染物

GB/T 18883—2002 室內(nèi)空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

WS 394公共場所集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)衛(wèi)生規(guī)范

消毒技術(shù)規(guī)范（衛(wèi)生部）

3空調(diào)冷卻水、冷凝水中嗜肺軍團(tuán)菌

3.1總則

本章規(guī)定了用培養(yǎng)法定性測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)冷卻水、冷凝水及其形成的沉積物、軟泥等樣品中 的嗜肺軍團(tuán)菌，其他洗浴水、溫泉水、景觀水等樣品中的嗜肺軍團(tuán)菌測定可參照執(zhí)行。

3.2原理

樣品經(jīng)培養(yǎng)在GVPC瓊脂平板上生成典型菌落，并在BCYE瓊脂平板上生長而在BCYE-CYE瓊 脂平板不生長，進(jìn)一步經(jīng)生化實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)實(shí)驗(yàn)鑒定確認(rèn)的菌落為嗜肺軍團(tuán)菌。

3.3儀器和設(shè)備

3.3.1 平皿：?90mm。

3.3.2 CO?培養(yǎng)箱：35°C?37°C。

3.3.3 紫外燈：波長 360 nm + 2 nm_o

3.3.4濾膜過濾器。

3.3.5 濾膜：孔徑 0.22 am?0.45 fzm。

3.3.6真空泵。

3.3.7離心機(jī)。

3.3.8渦旋振蕩器。

3.3.9普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡。

3.3.10水浴箱。

3.3.11廣口采樣瓶:玻璃或聚乙烯材料，磨口，容積500 mL。

3.4培養(yǎng)基和試劑

3.4.1 GVPC瓊脂平板。

3.4.2 BCYE瓊脂平板。

3.4.3 BCYE-CYE瓊脂平板(L-半光氨酸缺失的BCYE瓊脂平板)。

3.4.4革蘭氏染色液。

3.4.5馬尿酸鹽生化反應(yīng)管。

3.4.6軍團(tuán)菌分型血清試劑。

3.4.7硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液［_C(Na₂S₂O₃)=0.1 mol/L］。

3.5采樣

3.5.1將釆樣廣口瓶(3.1.11)用前滅菌。

3.5.2 每瓶中加入Na₂S₂O₃(c = 0.1 mol/L)0.3 mL?0.5 mL,中和樣品中的氧化物。

3.5.3水樣采集位置：冷卻水釆樣點(diǎn)設(shè)置在距塔壁20 cm、液面下10 cm處，冷凝水采樣點(diǎn)設(shè)置在排水 管或冷凝水盤處。

3.5.4每個釆樣點(diǎn)依無菌操作取水樣約500 mL。

3.5.5采集的樣品2 d內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，不必冷凍，但要避光和防止受熱，室溫下貯存不應(yīng)超過15 d。

3.6檢驗(yàn)步驟

3.6.1樣品的沉淀或離心：如有雜質(zhì)可靜置沉淀或1 000 r/min離心1 min去除。

3.6.2樣品的過濾：將經(jīng)沉淀或離心的樣品通過濾膜(3.1.5)過濾，取下濾膜置于15 mL滅菌水中，充分 洗脫,備用。

3.6.3樣品的熱處理:取1 mL洗脫樣品，置50 °C水浴(3.1.10)加熱30 min。

3.6.4樣品的酸處理：取5 mL洗脫樣品，調(diào)pH至2.2,輕輕搖勻，放置5 min。

3.6.5樣品的接種：取洗脫樣品(3.4.2)、熱處理樣品(3.4.3)及酸處理樣品(3.4.4)各0.1 mL,分別接種 GVPC 平板(3.2.1)。

3.6.6樣品的培養(yǎng)：將接種平板靜置于CO?培養(yǎng)箱(3.1.2)中，溫度為35笆?37 °C,CO₂濃度為2.5%。 無COz培養(yǎng)箱可釆用燭缸培養(yǎng)法。觀察到有培養(yǎng)物生成時(shí)，反轉(zhuǎn)平板，孵育10 d,注意保濕。

3.6.7菌落觀察:軍團(tuán)菌生長緩慢，易被其他菌掩蓋，從孵育第3 d開始每天在顯微鏡(3.1.9)±觀察。 軍團(tuán)菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍(lán)色或紫色，也能顯深褐色、灰綠色、深紅色;菌落整齊，表面 光滑，呈典型毛玻璃狀，在紫外燈下，部分菌落有熒光。

3.6.8 菌落驗(yàn)證：從平皿上挑取2個可疑菌落，接種BCYE瓊脂平板(3.2.2)和BCYE-CYE瓊脂平板 (3.2.3),35 °C?37 °C培養(yǎng)2 d,凡在BCYE瓊脂平板上生長而在BCYE-CYE瓊脂平板上不生長的則為 軍團(tuán)菌菌落。

3.6.9菌型確定：應(yīng)進(jìn)行生化培養(yǎng)與血清學(xué)實(shí)驗(yàn)確定嗜肺軍團(tuán)菌。生化培養(yǎng)：氧化酶(一/弱+ ),硝酸 鹽還原(一)，尿素酶(一)，明膠液化( + ),水解馬尿酸。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：用嗜肺軍團(tuán)菌診斷血清進(jìn)行分型。

4空調(diào)系統(tǒng)新風(fēng)量

本章規(guī)定了用風(fēng)管法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)的新風(fēng)量，即直接在新風(fēng)管上測定新風(fēng)量的方法。

本章規(guī)定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)新風(fēng)量的測定釆用GB/T 18204.1—2013中6.2的風(fēng)管法。

5空調(diào)送風(fēng)中可吸入顆粒物PM₁₀

5.1總則

本章規(guī)定了用光散射式粉塵儀測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中可吸入顆粒物PM?的質(zhì)量濃度，測量 范圍 0.001 mg/m³~10 mg/m³ _o

5.2原理

當(dāng)光照射在空氣中懸浮的顆粒物上時(shí)，產(chǎn)生散射光。在顆粒物性質(zhì)一定的條件下，顆粒物的散射光 強(qiáng)度與其質(zhì)量濃度成正比。通過測量散射光強(qiáng)度，應(yīng)用質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換系數(shù)K值，求得顆粒物質(zhì)量濃度。

5.3儀器

光散射式粉塵儀：顆粒物捕集特性D_a5o = 10 ftm士0.5呻,<7& = 1.5±0.1。

其中：D旬為捕集效率為50%時(shí)所對應(yīng)的顆粒物空氣動力學(xué)直徑；缶為捕集效率的幾何標(biāo)準(zhǔn)差。

測量靈敏度：對于校正粒子，儀器計(jì)數(shù)1 CPM=0.001 mg/m³ _o

測量相對誤差：對于校正粒子，測量相對誤差小于士10%。

測量范圍：優(yōu)于 0.001 mg/m³~10 mg/rt?。

儀器應(yīng)內(nèi)設(shè)岀廠前已標(biāo)定的具有光學(xué)穩(wěn)定性的自校裝置。

注1 :校正粒子為平均粒徑0.6 ?m、幾何標(biāo)準(zhǔn)偏差<?<1.25的聚苯乙烯粒子。

注2： CPM為每分鐘脈沖計(jì)數(shù)值，相對濃度的一種表示方法。

5.4測定步驟

5.4.1測點(diǎn)數(shù)量與位置

5.4.1.1每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個?5個送風(fēng)口進(jìn)行檢測。送風(fēng)口面積小于0.1 m²的設(shè)置1個檢測點(diǎn), 送風(fēng)口面積在0.1 m²以上的設(shè)置3個檢測點(diǎn)。

5.4.1.2風(fēng)口設(shè)置1個測點(diǎn)的在送風(fēng)口中心布置，設(shè)置3個測點(diǎn)的在送風(fēng)口對角線四等分的3個等分 點(diǎn)上布點(diǎn)。

5.4.1.3 檢測點(diǎn)位于送風(fēng)口散流器下風(fēng)方向15 cm?20 cm處。

5.4.2檢測時(shí)間與頻次

5.4.2.1應(yīng)在集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)條件下進(jìn)行檢測。

5.4.2.2 每個測點(diǎn)檢測3次。

5.4.3儀器操作

5.4.3.1對粉塵儀光學(xué)系統(tǒng)進(jìn)行自校準(zhǔn)。

5.4.3.2根據(jù)送風(fēng)中PM”濃度、儀器靈敏度、儀器測定范圍確定儀器測定時(shí)間。

5.4.3.3按使用說明書操作儀器。

5.5結(jié)果計(jì)算

5.5.1數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換

對于非質(zhì)量濃度的計(jì)數(shù)值，按式（1）轉(zhuǎn)換為PM“質(zhì)量濃度。

c =R ? K（ 1 ）

式中：

c ——可吸入顆粒物PM”的質(zhì)量濃度，單位為毫克每立方米（mg/m³ ）;

R——儀器計(jì)數(shù)值，單位為計(jì)數(shù)每分（CPM）；

K——質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換系數(shù)，單位為毫克每立方米計(jì)數(shù)每分Cmg/（m³ ? CPM）］。

注：質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換系數(shù)K的確定見GB/T 18204.2—2014附錄B。

5.5.2送風(fēng)口 PMp濃度計(jì)算

第k個送風(fēng)口 PM”的質(zhì)量濃度（“）按式（2）計(jì)算。

式中：

E——第丿個測點(diǎn)、第z次檢測值；

n——測點(diǎn)個數(shù)。

5.5.3空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中PM】。濃度測定結(jié)果

一個系統(tǒng)（a）送風(fēng)中PM”的測定結(jié)果（j）按該系統(tǒng)全部檢測的送風(fēng)口 PM”質(zhì)量濃度（“）的算術(shù) 平均值給出。

6空調(diào)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)

6.1總則

本章規(guī)定了用培養(yǎng)法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中的細(xì)菌總數(shù)。

6.2原理

集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中采集的樣品，計(jì)數(shù)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)35 °C?37 °C 38 h培養(yǎng)所生長 發(fā)育的嗜中溫性需氧和兼性厭氧菌落的總數(shù)為細(xì)菌總數(shù)。

6.3儀器和設(shè)備

6.3.1六級篩孔撞擊式微生物采樣器。

6.3.2高壓蒸汽滅菌器。

6.3.3恒溫培養(yǎng)箱。

6.3.4 平皿：。90 mm。

6.4 培養(yǎng)基

6.4.1營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基成分：

6.4.2制法:將蛋白腺、氯化鈉、肉膏溶于蒸餡水中，校正pH值為7.2?7.6,加入瓊脂,121 °C,20 min 滅菌備用。

6.5采樣

6.5.1釆樣點(diǎn)：每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個?5個送風(fēng)口進(jìn)行檢測，每個風(fēng)口設(shè)置1個測點(diǎn)，一般設(shè)在送風(fēng) 口下方15 cm?20 cm、水平方向向外50 cm?100 cm處。

6.5.2釆樣環(huán)境條件：采樣時(shí)集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)應(yīng)在正常運(yùn)轉(zhuǎn)條件下，并關(guān)閉門窗15 min?30 min以 上，盡量減少人員活動幅度與頻率，記錄室內(nèi)人員數(shù)量、溫濕度與天氣狀況等。

6.5.3釆樣方法：以無菌操作，使用撞擊式微生物釆樣器（6.3.1）以28.3 L/min流量釆集5 min? 15 min。

6.6檢驗(yàn)步驟

將釆集細(xì)菌后的營養(yǎng)瓊脂平皿置35 °C?37笆培養(yǎng)48 h,菌落計(jì)數(shù)。

6.7結(jié)果報(bào)告

6.7.1送風(fēng)口細(xì)菌總數(shù)測定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與采氣體積換算成CFU/m³ （每立方 米空氣中菌落形成單位）。

6.7.2空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)測定結(jié)果：一個空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中細(xì)菌總數(shù)的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢 測的送風(fēng)口細(xì)菌總數(shù)測定值中的最大值給出。

7空調(diào)送風(fēng)中真菌總數(shù)

7.1總則

本章規(guī)定了用培養(yǎng)法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中的真菌總數(shù)。

7.2原理

集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中采集的樣品，計(jì)數(shù)在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)28 °C、5 d培養(yǎng)所形成的菌落 數(shù)為真菌總數(shù)。

7.3儀器和設(shè)備

見 6.3 □

7.4培養(yǎng)基

7.4.1沙氏瓊脂培養(yǎng)基成分：

蛋白腺 10 g

葡萄糖 40 g

瓊脂 20 g

蒸璃水 1 000 mL

7.4.2制法：將蛋白腺、葡萄糖溶于蒸饞水中，校正pH為5.5-6.0,加入瓊脂，115 °C , 15 min滅菌 備用。

7.5采樣

7.6檢驗(yàn)步驟

將釆集真菌后的沙氏瓊脂培養(yǎng)基平皿置28 °C培養(yǎng)5 d,逐日觀察并于第5天記錄結(jié)果。若真菌數(shù) 量過多可于第3天計(jì)數(shù)結(jié)果，并記錄培養(yǎng)時(shí)間。

7.7結(jié)果報(bào)告

7.7.1送風(fēng)口真菌總數(shù)測定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與釆氣體積換算成CFU/m³ （每立方 米空氣中菌落形成單位）。

7.7.2空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中真菌總數(shù)測定結(jié)果:一個空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中真菌總數(shù)的測定結(jié)果按該系統(tǒng)全部檢 測的送風(fēng)口真菌總數(shù)測定值中的最大值給出。

8空調(diào)送風(fēng)中*溶血性鏈球菌 8.1總則

本章規(guī)定了用培養(yǎng)法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中的8-溶血性鏈球菌。

8.2原理

集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中釆集的樣品，經(jīng)35 °C?37笆、24 h?48 h培養(yǎng)，在血瓊脂平板上形成的 典型菌落為8-溶血性鏈球菌。

8.3儀器和設(shè)備

8.4培養(yǎng)基 8.4.1血瓊脂平板成分:

蛋白膘 氯化鈉 瓊脂 脫纖維羊血蒸饞水

8.4.2制法：將蛋白臉、氯化鈉、肉膏加熱溶化于蒸饞水中，校正pH為7.4?7.6,加入瓊脂，121 °C

20 min滅菌。待冷卻至50笆左右，以無菌操作加入脫纖維羊血，搖勻傾皿。

8.5釆樣

見 6.5。

8.6檢驗(yàn)步驟 8.6.1培養(yǎng)方法：采樣后的血瓊脂平板在35 °C?37 °C下培養(yǎng)24 h?48 h。

8.6.2結(jié)果觀察：培養(yǎng)后，在血瓊脂平板上形成呈灰白色、表面突起、直徑0.5 mm?0.7 mm的細(xì)小菌 落，菌落透明或半透明，表面光滑有乳光;鏡檢為革蘭氏陽性無芽抱球菌，圓形或卵圓形，呈鏈狀排列，受 培養(yǎng)與操作條件影響鏈的長度在4個?8個細(xì)胞至幾十個細(xì)胞之間；菌落周圍有明顯的2 mm?4 mm 界限分明、完全透明的無色溶血環(huán)。符合上述特征的菌落為阡溶血性鏈球菌。

8.7結(jié)果報(bào)告

8.7.1送風(fēng)口方溶血性鏈球菌測定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比與采氣體積換算成CFU/m³ （每立方米空氣中菌落形成單位）O

8.7.2空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中溶血性鏈球菌測定結(jié)果：一個空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中田溶血性鏈球菌的測定結(jié)果按 該系統(tǒng)全部檢測的送風(fēng)口片溶血性鏈球菌測定值中的最大值給出。

9空調(diào)送風(fēng)中嗜肺軍團(tuán)菌

9.1總則

本章規(guī)定了用液體沖擊法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中的嗜肺軍團(tuán)菌。

9.2原理

采用液體沖擊法釆集集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)送風(fēng)中的氣溶膠，樣品經(jīng)培養(yǎng)在GVPC瓊脂平板上生成典 型菌落，并在BCYE瓊脂平板上生長而在BCYE-CYE瓊脂平板不生長，進(jìn)一步經(jīng)生化實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)實(shí) 驗(yàn)鑒定確認(rèn)的菌落為嗜肺軍團(tuán)菌。

9.3儀器和設(shè)備

9.3.1微生物氣溶膠濃縮器：釆樣流量＞100 L/min,對于直徑3.0 firn以上粒子其捕集效率＞80% （或 濃縮比28）。

9.3.2液體沖擊式微生物氣溶膠釆樣器：釆樣流量7 L/min?15 L/min,對于0.5 粒子的捕集 效率290%。

9.3.3 離心管：容積50 mL_o

9.3.4 平皿：小90 mm。

9.3.5 COz 培養(yǎng)箱：35°C?37°C。

9.3.6 紫外燈：波長 360 nm±2 nm_o

9.3.7渦旋振蕩器。

9.3.8普通光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡。

9.3.9水浴箱。

9.4試劑和培養(yǎng)基

9.4.1釆樣吸收液1——GVPC液體培養(yǎng)基

9.4.1.1 GVPC添加劑成分：

多粘菌素B硫酸鹽 10 mg

萬古霉素 0.5 mg

放線菌酮 80 mg

9.4.1.2 BCYE添加劑成分：

a-酮戊二酸 1.0 g

N-2酰胺基-2胺基乙烷磺酸（ACES） 10.0 g

氫氧化鉀 2.88 g

L-半胱氨酸鹽酸鹽 0.4 g

焦磷酸鐵 0.25 g

9.4.1.3吸收液成分:

活性炭 酵母浸出粉

GVPC添加劑

BCYE添加劑

蒸饞水

9.4.1.4制法：將活性炭、酵母浸出粉加水至1 000 mL,121 °C下高壓滅菌15 min,加入GVPC添加劑

(9.4.1.1)和BCYE添加劑(9.4.1.2),分裝于滅菌后的離心管(9.3.3)中備用。

9.4.2采樣吸收液2——酵母提取液

9.4.2.1吸收液成分：

9.4.2.2 制法：將酵母浸出粉加水至1 000 mL, 121 °C下高壓滅菌15 min,分裝于滅菌后的離心管 (9.3.3)中備用。

9.4.3 鹽酸氯化鉀溶液[c(HCl ? KCl)=0.01 mol/L]

9.4.3.1 成分：

鹽酸(0.2 mol/L) 氯化鉀(0.2 mol/L)

9.4.3.2制法：將上述成分混合，用1 mol/L氫氧化鈉調(diào)整pH = 2.2 + 0.2,121笆下高壓滅菌15 min 備用。

9.4.4 GVPC瓊脂平板。

9.4.5 BCYE瓊脂平板。

9.4.6 BCYE-CYE 瓊脂平板。

9.4.7革蘭氏染色液。

9.4.8馬尿酸鹽生化反應(yīng)管。

9.4.9軍團(tuán)菌分型血清試劑。

9.5釆樣

9.5.1采樣點(diǎn)：每套空調(diào)系統(tǒng)選擇3個?5個送風(fēng)口進(jìn)行檢測，每個風(fēng)口設(shè)置1個測點(diǎn)，一般設(shè)在送風(fēng) 口下方15 cm?20 cm、水平方向向外50 cm?100 cm處。

9.5.2將釆樣吸收液1(9.4.1)20 mL倒入微生物氣溶膠釆樣器(9.3.2)中，然后用吸管加入礦物油 1滴?2滴。

9.5.3將微生物氣溶膠濃縮器(9.3.1)與微生物氣溶膠釆樣器(9.3.2)連接,按照微生物氣溶膠濃縮器和 微生物氣溶膠釆樣器的流量要求調(diào)整主流量和濃縮流量。

9.5.4按濃縮器和采樣器說明書操作，每個氣溶膠樣品釆集空氣量1 n??2

9.5.5將釆樣吸收液2(9.4.2)20 mL倒入微生物氣溶膠釆樣器(9.3.2)中，然后用吸管加入礦物油 1滴?2滴；在相同釆樣點(diǎn)重復(fù)9.5.3?9.5.4步驟。

9.5.6釆集的樣品不必冷凍，但要避光和防止受熱,4 h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。

9.6檢驗(yàn)步驟

9.6.1樣品的酸處理:對采樣后的吸收液1(9.4.1)和吸收液20.4.2)原液各取1 mL,分別加入鹽酸氯 化鉀溶液(9.4.3)充分混合，調(diào)pH至2.2,靜置15 min。

9.6.2樣品的接種：在酸處理后的2種樣品(9.6.1)中分別加入1 mol/L氫氧化鉀溶液，中和至pH為 6.9,各取懸液0.2 mL?0.3 mL分別接種GVPC平板(9.4.4)。

9.6.3樣品的培養(yǎng):將接種平板靜置于濃度為5%、溫度為35笆?37 °C的CO?培養(yǎng)箱(9.3.5)中，孵育 10 d_o

9.6.4菌落觀察:從孵育第3天開始觀察菌落。軍團(tuán)菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍(lán)色或紫 色，也能顯深褐色、灰綠色、深紅色；菌落整齊，表面光滑，呈典型毛玻璃狀，在紫外燈下，部分菌落有 熒光。

9.6.5 菌落驗(yàn)證：從平皿上挑取2個可疑菌落，接種BCYE瓊脂平板(9.4.5)和BCYE-CYE瓊脂平板 (9.4.6) ,35 °C?37 °C培養(yǎng)2 d,凡在BCYE瓊脂平板上生長而在BCYE-CYE瓊脂平板不生長的則為軍 團(tuán)菌菌落。

9.6.6菌型確定：應(yīng)進(jìn)行生化培養(yǎng)與血清學(xué)實(shí)驗(yàn)確定嗜肺軍團(tuán)菌。生化培養(yǎng)：氧化酶(一/弱+ ),硝酸 鹽還原(一)，尿素酶(一)，明膠液化( + ),水解馬尿酸。血清學(xué)實(shí)驗(yàn)：用嗜肺軍團(tuán)菌診斷血清進(jìn)行分型。

9.7結(jié)果報(bào)告

9.7.1釆樣點(diǎn)測定結(jié)果：兩種釆樣吸收液中至少有一種吸收液培養(yǎng)出嗜肺軍團(tuán)菌，即為該釆樣點(diǎn)嗜肺 軍團(tuán)菌陽性。

9.7.2 一套系統(tǒng)測定結(jié)果：一套系統(tǒng)中任意一個釆樣點(diǎn)嗜肺軍團(tuán)菌檢測陽性，即該空調(diào)系統(tǒng)送風(fēng)中嗜 肺軍團(tuán)菌的測定結(jié)果為陽性。

10空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面積塵量

10.1總則

本章規(guī)定了用稱重法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面的積塵量。

10.2原理

采集風(fēng)管內(nèi)表面規(guī)定面積的全部積塵，以稱重方法得出風(fēng)管內(nèi)表面單位面積的積塵量，表示空調(diào)風(fēng) 管的污染程度。

10.3設(shè)備和器材

10.3.1定量釆樣機(jī)器人或手工擦拭釆樣規(guī)格板：釆樣機(jī)器人采樣面積為50 cm²或100 cm²,釆樣精度 為與標(biāo)準(zhǔn)方法的相對誤差小于20%；采樣規(guī)格板面積為50 cm²或100 cm²,面積誤差小于5%。

10.3.2采樣材料:無紡布或其他不易失重的材料。

10.3.3密封袋。

10.3.4必要的采樣工具。

10.3.5 分析天平，精度0.00。1 g。

10.3.6恒溫箱。

10.3.7干燥器。

10.4采樣

10.4.1采樣點(diǎn)數(shù)量：機(jī)器人采樣每套空調(diào)系統(tǒng)至少選擇3個釆樣點(diǎn)，手工擦拭釆樣每套空調(diào)系統(tǒng)至少 選擇6個采樣點(diǎn)。

10.4.2采樣點(diǎn)布置：機(jī)器人采樣在每套空調(diào)系統(tǒng)的風(fēng)管(如送風(fēng)管、回風(fēng)管、新風(fēng)管)中選擇3個代表 性釆樣斷面，每個斷面設(shè)置1個采樣點(diǎn)。手工擦拭采樣在每套空調(diào)系統(tǒng)的風(fēng)管中選擇2個代表性采樣 斷面，每個斷面在風(fēng)管的上面、底面和側(cè)面各設(shè)置1個采樣點(diǎn)；如確實(shí)無法在風(fēng)管中采樣，可抽取該套系 統(tǒng)全部送風(fēng)口的3%?5%且不少于3個作為釆樣點(diǎn)。

10.4.3風(fēng)管開孔：在風(fēng)管釆樣時(shí)將維修孔、清潔孔打開或現(xiàn)場開孔，在送風(fēng)口釆樣時(shí)將風(fēng)口拆下。

10.4.4采樣:使用定量釆樣機(jī)器人或手工法(10.3.1)在確定的位置、規(guī)定的面積內(nèi)釆集風(fēng)管表面全部 積塵，表面積塵較多時(shí)用刮拭法采樣，積塵較少不適宜刮拭法時(shí)用擦拭法釆樣，并將積塵樣品完好帶出 風(fēng)管。

10.4.5影像資料的制備：用機(jī)器人對每個采樣點(diǎn)所代表的風(fēng)管區(qū)域內(nèi)表面情況進(jìn)行錄像，并將其制作 成錄像帶或光盤等影像資料。

10.5檢驗(yàn)步驟

10.5.1將釆樣材料(10.3.2)放在105笆恒溫箱(10.3.6)內(nèi)干燥2 h后放入干燥器(10.3.7)內(nèi)冷卻4 h, 或直接放入干燥器(10.3.7)中存放24 h后，放入密封袋(10.3.3)用天平(10.3.5)稱量出初重。

10.5.2將釆樣后的積塵樣品進(jìn)行編號，并放回原密封袋中保管，送實(shí)驗(yàn)室。

10.5.3將樣品按10.4.1處理、稱量，得出終質(zhì)重。

10.5.4各采樣點(diǎn)的積塵樣品終質(zhì)重與初質(zhì)重之差為各釆樣點(diǎn)的積塵質(zhì)量。

10.6結(jié)果計(jì)算

10.6.1采樣點(diǎn)積塵量：根據(jù)每個釆樣點(diǎn)積塵質(zhì)量和釆樣面積換算成每平方米風(fēng)管內(nèi)表面的積塵量。

10.6.2風(fēng)管污染程度：取各個釆樣點(diǎn)積塵量的平均值為風(fēng)管污染程度的測定結(jié)果，以g/m"每平方米 風(fēng)管內(nèi)表面積塵的質(zhì)量)表示。

11空調(diào)風(fēng)管內(nèi)表面微生物

11.1 總則

本章規(guī)定了用培養(yǎng)法測定集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面的細(xì)菌總數(shù)和真菌總數(shù)。

11.2原理

集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)風(fēng)管內(nèi)表面采集的樣品，計(jì)數(shù)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)35 °C?37 °C .48 h培養(yǎng)所 生長發(fā)育的嗜中溫性需氧和兼性厭氧菌落的總數(shù)為細(xì)菌總數(shù)；計(jì)數(shù)在沙氏瓊脂培養(yǎng)基上經(jīng)28 °C、5天 培養(yǎng)所形成的菌落數(shù)為真菌總數(shù)。

11.3儀器和設(shè)備

11.3.1定量采樣機(jī)器人或采樣規(guī)格板：釆樣機(jī)器人釆樣面積為50 cm²或100 cm²,采樣精度為與標(biāo)準(zhǔn) 方法的相對誤差小于20% ；釆樣規(guī)格板面積為25 cm\

11.3.2高壓蒸汽滅菌器。

11.3.3恒溫培養(yǎng)箱。

11.3.4 平皿:^90 mm_o

11.4培養(yǎng)基和試劑

11.4.1營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基:成分與制法見6.4。

10

11.4.2沙氏瓊脂培養(yǎng)基：成分與制法見7.4。

11.4.3 Tween-80(95 = 0.01 %) ? 11.5采樣

11.5.1釆樣點(diǎn)數(shù)量：見10.4.1。

11.5.2釆樣點(diǎn)布置：見10.4.2。

11.5.3釆樣：使用定量釆樣機(jī)器人或人工法(11.3.1)在確定的位置、規(guī)定的面積內(nèi)釆樣，表面積塵較多 時(shí)用刮拭法采樣，積塵較少不適宜刮拭法時(shí)用擦拭法釆樣。整個采樣過程應(yīng)無菌操作。為避免人工釆 樣對采樣環(huán)境的影響，宜采用機(jī)器人釆樣。

11.6檢驗(yàn)步驟

11.6.1刮拭法釆集的樣品：將釆集的積塵樣品無菌操作稱取1 g,加入到Tween-80水溶液(11.4.3)中， 做10倍梯級稀釋,取適宜稀釋度1 mL傾注法接種平皿。

11.6.2擦拭法釆集的樣品：將擦拭物無菌操作加入到Tween-80水溶液(11.4.3)中，做10倍梯級稀釋， 取適宜稀釋度1mL傾注法接種平皿。

11.6.3培養(yǎng)與計(jì)數(shù):分別見6.6和7.6。

11.7結(jié)果報(bào)告

11.7.1風(fēng)管表面細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)測定結(jié)果：菌落計(jì)數(shù)，記錄結(jié)果并按稀釋比換算成CFU/25 cm² (每25平方厘米風(fēng)管表面菌落形成單位)。

11.7.2空調(diào)系統(tǒng)風(fēng)管表面微生物測定結(jié)果：一個空調(diào)系統(tǒng)風(fēng)管表面細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)的測定結(jié)果分 別按該系統(tǒng)全部檢測的風(fēng)管表面細(xì)菌總數(shù)、真菌總數(shù)測定值中的最大值給出。

12空調(diào)系統(tǒng)凈化消毒裝置

12.1總則

本章規(guī)定了集中空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)凈化消毒裝置衛(wèi)生安全性和功能性指標(biāo)的測定方法。

12.2臭氧

空調(diào)系統(tǒng)空氣凈化消毒裝置釋放的臭氧濃度的測定釆用GB/T 15438中的紫外光度法或 GB/T 18204.2-2014中的11.2靛藍(lán)二磺酸鈉分光光度法。

12.3紫外線

空調(diào)系統(tǒng)空氣凈化消毒裝置紫外線泄露強(qiáng)度的測定采用衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》規(guī)定的方法。

12.4 總揮發(fā)性有機(jī)物TVOC

空調(diào)系統(tǒng)空氣凈化消毒裝置釋放的TVOC濃度的測定釆用GB/T 18883-2002附錄C中的熱解 析/毛細(xì)管氣相色譜法。

12.5可吸入顆粒物PM₁₀

空調(diào)系統(tǒng)空氣凈化消毒裝置釋放的PM”濃度的測定釆用GB/T 18204.2—2014中5.2光散射法。

11

12.6裝置阻力

用靜壓法測定集中空調(diào)系統(tǒng)空氣凈化消毒裝置的阻力。

12.6.1原理

空氣凈化消毒裝置在空氣動力學(xué)實(shí)驗(yàn)風(fēng)洞（實(shí)驗(yàn)室模擬空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行狀況）或在實(shí)際安裝的現(xiàn) 場條件下，分別測定裝置入口處空氣的靜壓（F.）和出口處空氣的靜壓（PQ,通過計(jì)算得出裝置阻力。

12.6.2儀器和設(shè)備

12.6.2.1標(biāo)準(zhǔn)皮托管：系數(shù)0.99士0.01。

12.6.2.2傾斜式微壓計(jì)或數(shù)字式微壓計(jì):最小讀數(shù)W1 Pa。

12.6.3測定步驟

12.6.3.1儀器連接:將皮托管的靜壓出口與微壓計(jì)負(fù)壓端連接,微壓計(jì)正壓端與大氣連通。

12.6.3.2測定條件：實(shí)驗(yàn)室測定時(shí)，根據(jù)凈化消毒裝置的不同功能（風(fēng)口凈化、風(fēng)管凈化、機(jī)組凈化），將 空氣動力學(xué)實(shí)驗(yàn)風(fēng)洞的風(fēng)量分別調(diào)整為裝置斷面通過風(fēng)速為高、中、低三種條件;在現(xiàn)場測定時(shí)，空調(diào)系 統(tǒng)正常運(yùn)行條件。

12.6.3.3靜壓的測定：將皮托管插入風(fēng)管內(nèi)，皮托管的全壓測孔朝向氣流方向，讀出靜壓值。

12.6.4結(jié)果計(jì)算

將裝置前后靜壓測定值代入式（3）可得出裝置在不同風(fēng)速條件下的阻力（AP）_O△P = P si — P so — ￡ AA（ 3 ）

式中：

P_s,——裝置前測定斷面空氣平均靜壓，單位為帕（Pa）;

P_sa——裝置后測定斷面空氣平均靜壓，單位為帕（Pa）；

SAA——裝置前測定斷面到裝置入口及裝置出口到后測定斷面的管道阻力之和，單位為帕（Pa）。

12.7顆粒物凈化效率

12.7.1原理

在空氣動力學(xué)實(shí)驗(yàn)風(fēng)洞的空氣凈化消毒裝置前段發(fā)生一定濃度的單分散相顆粒物條件下，或在實(shí) 際安裝的現(xiàn)場條件下，使用光散射法分別測定裝置入口和出口處管道空氣中PM”顆粒物濃度，通過計(jì) 算得出裝置的顆粒物一次凈化效率。

12.7.2儀器和設(shè)備

12.7.2.1空氣動力學(xué)實(shí)驗(yàn)風(fēng)洞:

12.7.2.3光散射粉塵儀：見5.3。

12.7.3測定步驟

12.7.3.1風(fēng)速條件：實(shí)驗(yàn)室測定時(shí)，按12.6.3.2的要求調(diào)整實(shí)驗(yàn)風(fēng)洞（12.7.2.1）的風(fēng)量；現(xiàn)場測定時(shí)，空 調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行條件。

12.7.3.2粒子條件：實(shí)驗(yàn)室測定時(shí)，利用標(biāo)準(zhǔn)粒子發(fā)生器（12.7.2.2）在0.5 fzm~8 fun范圍內(nèi)發(fā)生5種 代表性粒徑的單分散相標(biāo)準(zhǔn)粒子，發(fā)生粒子的濃度在3倍?10倍標(biāo)準(zhǔn)值范圍內(nèi)；現(xiàn)場測定時(shí)，為現(xiàn)場環(huán) 境空氣中的PM”顆粒物。

12.7.3.3檢測點(diǎn)：在空氣凈化消毒裝置上下游的實(shí)驗(yàn)風(fēng)洞檢測斷面中心各設(shè)置1個檢測點(diǎn)，在現(xiàn)場測 定時(shí)凈化裝置上下游的風(fēng)管檢測斷面各設(shè)置3個?5個檢測點(diǎn)。

12.7.3.4檢測時(shí)保證顆粒物等動力采樣條件。

12.7.3.5使用兩臺光散射粉塵儀測定濃度時(shí)，兩臺儀器的型號和性能應(yīng)相同。

12.7.3.6儀器穩(wěn)定后讀數(shù)，每個點(diǎn)測定3次。

12.7.3.7按使用說明書操作光散射粉塵儀。

12.7.4結(jié)果計(jì)算

12.7.4.1現(xiàn)場評價(jià)

檢測斷面平均濃度：按式（4）分別計(jì)算空氣凈化消毒裝置上下游檢測斷面PM”質(zhì)量濃度j和隊(duì)。

式中：

C, ——1 = 1或2,分別為上下游PM,。平均質(zhì)量濃度，單位為毫克每立方米（rng/m³）； m  檢測斷面上的測點(diǎn)數(shù),zn = 3?5；

n ——每個測點(diǎn)的測定次數(shù)5 = 3；

j ——第j個測點(diǎn)第&次測定值,單位為毫克每立方米（mg/m³）_o

PM】。一次通過凈化效率卩按式（5）計(jì)算。₇ = ^C1 ~ - X 100%（ 5 ）c 1

12.7.4.2實(shí)驗(yàn)室評價(jià)

檢測斷面平均濃度：按式（6）分別計(jì)算空氣凈化消毒裝置上下游檢測斷面某一粒徑粒子的質(zhì)量濃度

和 ^cd2 Of =丄京c辦（6 ）⁷² k = 1

式中：

瞞——，=1或2,分別為上下游粒徑為疽的粒子的質(zhì)量濃度，單位為毫克每立方米（mg/m³）_;

n ——每個測點(diǎn)的測定次數(shù)頂=3；

c_dk——第左次測定值，單位為毫克每立方米（mg/n?）。

粒徑為d的粒子一次通過凈化效率衍按式（7）計(jì)算。^=^C^~—X100%（7）c d\

PM]。顆粒物一次通過凈化效率化Me按式(8)計(jì)算。p￡官 PMio (』)X 卩(#)]— p( 8 )E^CPM1O(』)]d = 1

式中：

^PMlo PM”顆粒物一次通過凈化效率，％；

Cpm.c  環(huán)境中PM₁₀粒度分布,單位為毫克每立方米(mg/m³)；

伸)—凈化裝置分級效率回歸方程對應(yīng)的函數(shù)值，％ ；

d  粒子粒徑，d = 1 *m,2 /im,…，？；

P ——PM”顆粒物粒徑范圍。

12.8微生物凈化效率

用培養(yǎng)法測定集中空調(diào)系統(tǒng)空氣凈化消毒裝置的微生物一次通過凈化效率或消毒效果。

12.8.1原理

通過測定一定狀態(tài)下空氣中微生物數(shù)量在空氣凈化消毒裝置前后的變化來計(jì)算凈化或消毒效率,

從而評價(jià)空氣凈化消毒裝置的凈化消毒效果。

12.8.2儀器和材料

12.8.2.1試驗(yàn)菌：空氣中的自然菌，菌量500 CFU/n??2 500 CFU/m³ _o

12.8.2.2采樣器:六級篩孔空氣撞擊式釆樣器。

12.8.2.3 磷酸鹽緩沖液(c = 0.03 mol/L)：_PH7.2_o

12.8.2.4營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：成分與制法見6.4。

12.8.2.5溫度計(jì)。

12.8.2.6濕度計(jì)。

12.8.3檢驗(yàn)步驟

12.8.3.1 風(fēng)速條件：見 12.7.3.1。

12.8.3.2釆樣點(diǎn)：在空氣凈化消毒裝置前后的中間位置各設(shè)置1個采樣點(diǎn)。

12.8.3.3分別將兩臺六級篩孔空氣撞擊式釆樣器置于前后采樣點(diǎn)，開啟空氣凈化消毒裝置，待運(yùn)行穩(wěn)

定后，同時(shí)釆集裝置前后的空氣，流量為28.3 L/min,采樣時(shí)間為5 min?15 min。

12.8.3.4采樣結(jié)束后，將平板放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，同時(shí)將同批次試驗(yàn)用培養(yǎng)基置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)作為陰

性對照，培養(yǎng)溫度35 °C?37 °C, 48 h記錄結(jié)果。陰性對照組應(yīng)無菌生長。

12.8.3.5 重復(fù)釆樣3次。

12.8.4結(jié)果報(bào)告

凈化效率或消除率:按式(9)計(jì)算。C=^W°~^W1 X 100%( 9 )Wo

式中：

C——微生物凈化效率或消除率，％；

——裝置前段樣本平均菌落數(shù)，單位為每立方米菌落形成單位(CFU/m³)；

Wi——-裝置后段樣本平均菌落數(shù)，單位為每立方米菌落形成單位(CFU/m³)_o

12.9冷卻水中微生物凈化效率

集中空調(diào)系統(tǒng)冷卻水凈化消毒裝置微生物凈化效率的測定釆用WS 394規(guī)定的方法。